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熒光顯微鏡分類及鏡檢術注意事項

更新時間:2014-07-10   點擊次數(shù):2478次
  熒光顯微鏡是用短波長的光線照射用熒光素染色過的被檢物體,使之受激發(fā)后而產(chǎn)生長波長的熒光,然后觀察。熒光顯微鏡廣泛應用于生物等領域。

  (1)熒光顯微鏡一般分為透射和落射式兩種類型:

  a.透射式:激發(fā)光來自被檢物體的下方,聚光鏡為暗視野聚光鏡,使激發(fā)光不進入物鏡,而使熒光進入物鏡。它在低倍情況下明亮,而高倍則暗,在油浸和調(diào)中時,較難操作,尤以低倍的照明范圍難于確定,但能得到很暗的視野背景。透射式不使用于非透明的被檢物體。

  b.落射式:透射式目前幾乎被淘汰,新型的熒光顯微鏡多為落射式,光源來自被檢物體的上方,在光路中具有分光鏡,所以對透明和不透明的被檢物體都適用。由于物鏡起了聚光鏡的作用,不僅便于操作,而且從低倍到高倍,可以實現(xiàn)整個視場的均勻照明。

  (2)熒光鏡檢術的注意事項:

  a.激發(fā)光長時間的照射,會發(fā)生熒光的衰減和淬滅現(xiàn)象,因此盡可能縮短觀察時間,暫時不觀察時,應用擋板遮蓋激發(fā)光。

  b.作油鏡觀察時,應用"無熒光油"。

  c.熒光幾乎都較弱,應在較暗的室內(nèi)進行。

  d.電源裝穩(wěn)壓器,否則電壓不穩(wěn)不僅會降低汞燈的壽命,也會影響鏡檢的效果。

  目前許多新興生物研究領域應用到熒光顯微鏡,如基因原位雜交(fish)等等。

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